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    071章 不要大意！(第 1/3 页)

    第十题，实验设计题。请同学们阅读一篇材料。

    核酸限制性内切酶是重组dna技术中最重要的工具酶之一，它是一类能识别双链dna中特定碱基序列，内切方式水解dna链的核酸水解酶。最适合基因工程操作的限制内切酶为第二类内切酶，这类酶的一个重要特点是切割的断裂点都在反转重复序列上，亦称回文式序列，如：

    ecor i

    5’-g↓aatt c-3’

    3’-c ttaa↑g-5’

    bamh i

    ……

    请设计一个质粒dna的限制性内切酶酶解鉴定实验。

    ‘还好我做过核酸的其他实验，这个核酸限制性内切酶的实验设计，编吧！’

    兰杰并没有亲手做过限制性内切酶的实验，他也很想做啊，然而限制内切酶是昂贵的生化试剂，教练不给他做。

    这个时候，兰杰只能依靠类似实验的操作经历及丰富的理论知识储备，进行合理的编排。

    第一步，酶切反应。

    第二步，电泳凝胶板的制备。

    第三步，电泳加样。

    第四步，电泳与鉴定。

    兰杰首先设计出四个主要的实验步骤。

    需要的实验材料包括：质粒dna、反应缓冲液、bsa、限制性内切酶……

    需要的实验器材包括：电泳槽与电泳仪、紫外检测仪、电热恒温水浴箱……

    然后就是细化每一个步骤，写出具体的实验操作细节。

    ‘设计完了，理论上应该是可行的。’

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